Western Blot样本取材要求

（一）新鲜组织

1．操作时带手套、口罩、帽子（须无菌操作，避免样本污染）。

2．取材器械事先进行高压灭菌，尽量做到无RNA酶，取材时有条件再用酒精灯火焰消毒。

3．取材时间尽可能短（在5分钟内取好一个样本，有血迹可用PBS液或生理盐水冲洗后放入冷冻管中或进口的Eppendorf管，然后再放入液氮中）。

4．组织大小：至少100mg。

（二）血液

1．取血1-2毫升，放入加有4%EDTA-2Na抗凝剂管子中（每1ml血液中加30ul抗凝剂），混匀。

2．加3倍体积的红细胞裂解液，室温放置5分钟，间或混匀1次，10000转/分离心1分钟（或2000转/分15分钟），去掉上清。

3．沉淀中加1毫升Trizol，振动混匀，冻在-80℃冰箱，送出时用冰块保存。

（三）细胞

 1．细胞数目至少1*107。

 2．贴壁的细胞用胰酶消化下来，1500转/分离心5分钟去掉上清。冻在-80℃冰箱，送出时用液氮保存。

蛋白质学检测